A esterilização de sala limpa significa matar ou remover todos os microorganismos (incluindo bactérias, vírus, etc.) em uma substância, o que é de importância absoluta. Em outras palavras, corresponder à esterilização é não esterilização, e não há estado intermediário de mais esterilização e menos esterilização. Deste ponto de vista, a esterilização absoluta é quase inexistente porque é difícil de conseguir ou atinge um tempo infinito.
Os métodos de esterilização comumente usados incluem principalmente: esterilização por secagem em alta temperatura, esterilização a vapor de alta pressão, esterilização a gás, esterilização por filtro, esterilização por radiação e assim por diante.